ΟΔΗΓΙΕΣ ΓΙΑ ΚΥΤΤΑΡΟΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΕΣ-ΧΡΗΣΗ ΘΑΛΑΜΟΥ ΚΥΤΤΑΡΟΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΩΝ

Κύριο χαρακτηριστικό των εργαστηρίων κυτταρικής καλλιέργειας είναι οι αποστειρωμένες συνθήκες που πρέπει να επικρατούν στον χώρο.

Α. ΠΙΠΕΤΕΣ

Θα πρέπει να είναι αριθμημένες με το μέγιστο στο πάνω μέρος. Υπάρχουν :

Πιπέτες παστερ γυάλινες. Αποστειρώνονται και μετά τη χρήση απορρίπτονται

Γυάλινες πιπέτες. Αποστειρώνονται σε μεταλλικά κυλινδρικά δοχεία

Πλαστικές πιπέτες. Μιας χρήσης και αποστειρωμένες. Οι πιο ασφαλείς.

1. Πάντα χρησιμοποιούμε πιπέτες που έχουν φραγμένο το άνω άκρο με βαμβάκι.

2. Δεν αδειάζουμε το περιεχόμενο της πιπέτας βίαια.

3. Προσέχουμε πάντα την τελευταία σταγόνα. Αποτελεί εστία μόλυνσης.

4. Όταν αδειάζουμε το περιεχόμενο της πιπέττας δεν το κάνουμε από ύψος. Το αφήνουμε να κυλήσει ήρεμα στα τοιχώματα του τρυβλίου.

5. Όταν δουλεύουμε στον θάλαμο, έχουμε πάντα ένα αποστειρωμένο δοχείο για να απορρίπτουμε τα ρύγχη και τις πιπέτες.

Β. ΔΟΥΛΕΥΟΝΤΑΣ ΣΤΟΝ ΘΑΛΑΜΟ

1. Πριν δουλέψουμε στον θάλαμο, διαβάζουμε τις οδηγίες χρήσης. Κάθε θάλαμος έχει ιδιαίτερα χαρακτηριστικά.

2. Θα πρέπει να καταλάβουμε πώς δουλεύει ο θάλαμος.

3. Εάν ο θάλαμος εξαερίζεται καθέτως δεν δουλεύουμε πάνω από ανοιχτά μπουκάλια. Εάν εξαερίζεται οριζοντίως δεν δουλεύουμε πίσω από ανοιχτά μπουκάλια.

4. Δεν θα πρέπει να εμποδίζουμε την ροή αέρα του θαλάμου. Γρήγορες κινήσεις των χεριών και ανοιχτές πόρτες στο εργαστήριο μπορούν να μειώσουν την αποτελεσματικότητα του θαλάμου.

5. Προγραμματίζουμε την δουλειά μας έτσι, ώστε να μην χρειάζεται να βγάζουμε τα χέρια μας συχνά έξω από τον θάλαμο

6. Στον θάλαμο βάζουμε όλα χρειάζονται για τον πείραμά μας μόνο, για να μειώσουμε την πιθανότητα μόλυνσης και να μην εμποδίζουμε την ροή του αέρα

Γ. ΟΔΗΓΙΕΣ ΧΡΗΣΗΣ ΘΑΛΑΜΟΥ

1. Πριν την χρήση, καθαρίζουμε την θάλαμο με 70% αιθανόλη. Καθαρίζουμε επίσης οτιδήποτε θα μας χρειαστεί και το τοποθετούμε στον θάλαμο.

2. Προγραμματίζουμε το πείραμα έτσι ώστε όλα τα υλικά που θα χρειαστούμε να βρίσκονται στον θάλαμο.

3. Πάντα χρησιμοποιούμε αποστειρωμένο δοχείο για να απορρίπτουμε τα υλικά που χρησιμοποιούμε.

4. Είναι προτιμότερα τα μπουκάλια με βιδωτά καπάκια.

5. Κάθε φορά που ανοίγουμε τρυβλίο ή μπουκάλι, το καπάκι τοποθετείται ανάποδα ή ακόμα καλύτερα το κρατάμε στο χέρι μας.

6. Όταν δουλεύουμε διαχωρίζουμε τα αποστειρωμένα από τα μη-αποστειρωμένα. Δουλεύουμε με φορά από τα καθαρά στα μη-αποστειρωμένα, όπως στην φωτογραφία

7. Αν πέσει υγρό στον θάλαμο, το καθαρίζουμε με 70% αιθανόλη αμέσως. Περιμένουμε λίγα λεπτά και μετά ξαναρχίζουμε.

8. Όταν τελειώσουμε το πείραμά μας, μαζεύουμε τα υλικά μας και καθαρίζουμε τον θάλαμο σχολαστικά με 70% αιθανόλη. Ανοίγουμε το UV για 15 λεπτά.

Δ. ΔΟΥΛΕΥΟΝΤΑΣ ΜΕ ΥΓΡΟ ΑΖΩΤΟ

1. Όταν δουλεύουμε με υγρό άζωτο, χρησιμοποιούμε πάντα γάντια για την αποφυγή εγκαυμάτων.

2. Πολύ χαμηλές θερμοκρασίες είναι πιθανό να έχουν επιπτώσεις σε ορισμένα όργανα. Θα πρέπει να το θυμόμαστε κάθε φορά που χειριζόμαστε μηχανήματα που ήταν ή είναι σε χώρο με χαμηλή θερμοκρασία.

3. Υψηλές πιέσεις μπορεί να προκαλέσουν ρωγμές σε φιαλίδια.

Ε. ΠΡΟΣΩΠΙΚΗ ΥΓΙΕΙΝΗ.

1. Πλύσιμο χεριών για απομάκρυνση μικροοργανισμών και ενυδάτωση, ώστε να μην πέφτουν νεκρά κύτταρα στον θάλαμο.

2. Τα γάντια θα πρέπει να ψεκάζονται με 70% αιθανόλη κάθε φορά που βγάζουμε τα χέρια μας από τον θάλαμο.

3. Τα μαλλιά θα πρέπει να είναι πιασμένα πίσω.

4. ‘Οταν είμαστε άρρωστοι, καλό θα είναι να αποφεύγουμε να δουλεύουμε στον θάλαμο.

ΣΤ. ΑΠΟΦΥΓΗ ΜΟΛΥΝΣΕΩΝ-ΜΕΘΟΔΟΙ

Για την αποφυγή μολύνσεων χρησιμοποιούμε μεθόδους :

Α) Αποστείρωσης. Φυσική ή χημική κατεργασία για την καταστροφή όλων των μικροβίων, συμπεριλαμβανομένων και των ανθεκτικών σπορίων.

Β) Απολύμανσης. Καταστρέφει όλους τους παθογενείς μικροοργανισμούς οι οποίοι δεν σχηματίζουν σπόρια, αλλά όχι απαραίτητα όλες τις μικροβιακές μορφές. Η αποτελεσματικότητα της μεθόδου εξαρτάται από διάφορους παράγοντες όπως το είδος και ο αριθμός των μικροοργανισμών, το αντικείμενο το οποίο απολυμαίνεται καθώς και ο χρόνος έκθεσης, η θερμοκρασία και η συγκέντρωση.

Γ) Αντισηψίας. Η μέθοδος αυτή χρησιμοποιεί υγρά, αντιμικροβιακά χημικά στο δέρμα ή ζωντανό ιστό για την καταστροφή μικροοργανισμών. Ορισμένα απολυμαντικά είναι και αντισηπτικά, χωρίς αυτό να σημαίνει όταν αν είναι καλό ένα αντισηπτικό θα είναι απαραίτητα και καλό απολυμαντικό και αντίστροφα.

Για την αποφυγή μολύνσεων χρησιμοποιούνται :

Α) Θερμοκρασία. Υγρή υψηλή θερμοκρασία είναι η πιο αξιόπιστη μέθοδος αποστείρωσης και η καλύτερη μέθοδος γρήγορης καταστροφής μικροβίων.

Β) Υγρή απολύμανση. Αραιωμένη χλωρίνη (1/10) για τον καθαρισμό επιφανειών για την καταστροφή παθογόνων μικροοργανισμών.

Γ) Αέρια απολύμανση. Χρήση αερίου (οξείδιο του αιθυλενίου) ή χημικών ατμών (φορμαλδεΰδη). Δεν χρησιμοποιείται